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细胞系开发ELISA试剂盒测定操作简便

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492482092 发表于 2023-9-27 22:25:13
  因此,每一批号的ELISA试剂盒板在使用前须事先检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA试剂盒板各孔,细胞系开发洗涤后每孔内加入适当稀释度的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后,分别测每孔溶液的吸光度。
  1、切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
  2、合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
  3、在吸取液体时,ELISA试剂盒要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
  4、务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
  5、样品稀释液应用加液器加注,ELISA试剂盒并经常校对其准确性。
  6、为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
  7、未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃ 保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG 工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG 工作液。
  8、ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
  现在ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室运用时对所供应的浓缩液稀释制作,因而稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。当试剂盒以OPD为底物时,则底物溶液应在反应显色前暂时制作。

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