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我司派遣资深技术为您解答Elisa实验过程中影响的因素有哪些。
首先需要关键一步选择试剂:
选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
体内药理参考准备ELISA实验的正确步骤#ELISA实验的事前准备工作一
标本收集与保存:
避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;
2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下。
请避免反复冻融。
具体请参照:
ELISA实验标本的采集与处理:
ELISA实验标本的保存:
试剂使用中的准备工作及注意事项:
试剂盒中会有提示,一般需要准备的有:
洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。
显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;
标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存;有的是要现配制的;按照说明书操作;
浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);
原则是:
试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;
还有,小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以後总量不够。
加 样:
室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大。特别要注意加样问题。
不好的操作原因:
不会正确使用加样器;
血清或血浆标本分离不好即进行加样;
手工操作中,加样板过多造成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外;
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