慢病毒生产ELISA实验的通用规则

ningxueqin · 发表于 2023-2-20 20:22:26

　　酶联免疫吸附测定指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，慢病毒生产利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定（ELISA）为免疫学中的经典实验，本文主要介绍实验过程中的通用规则。
　　ELISA实验通用规则：
　　1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%.可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。
　　2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
　　3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
　　4、实验时，要使底物避光保存。
　　5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
　　6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
　　7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
　　8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
　　9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
　　10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
　　11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
　　12、底物是光敏感的，要在临用前现配医——学教育网搜集整理。
　　13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
　　14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
　　15、待检样品要澄清，否则会影响结果。
　　16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
　　17、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
　　18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

慢病毒生产ELISA实验的通用规则

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