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单克隆抗体药物有哪些?一般ProteinA层析介质的理论载量为70-80g/L左右。高载量可以减少层析柱的体积。保留时间是指样品在层析柱内的停留时间或样品与层析介质的接触时间。较低的保留时间可以使用较快的流速,从而提高生产效率在抗体纯化工艺开发时,动态载量以及保留时间是一个平衡的过程,单纯追求高动态载量,可能保留时间会较长,使得上样时间延长,这样培养基中的蛋白酶就有时间分解样品,以及上样时蛋白酶降解Protein A,使Protein A的脱落增加。另外一些高载量的protein A 层析介质,是通过提高配基密度(ProteinA)增加动态载量的。但是配基密度提高过程中,如果配基与的层析基质(骨架)的偶联不稳定,就会增加protein A的脱落。此类ProteinA介质在初期动态载量较高,经过一段时间的使用,随着配基的脱落,载量很快降低。
单纯追求高流速,可能会使层析介质的柱压升高,提高了纯化过程中对生产设备(层析柱以及层析系统)的要求。随着上样次数的增多(生产循环次数的增加)层析介质的反压增高,从而减少层析介质的寿命。另外,有文献报道,以硅胶基质或CPG的层析介质在重复装柱的过程中易破碎,从而增加运行的压力以及减少介质的使用寿命。现代的Protein A的动态载量一般在35-60g/L之间,保留时间一般在3-5min左右(20cm柱床高度,线性流速在250-400cm/h)。
随着细胞培养条件的改善,抗体的表达量的提高(由原来的1-2g/L提高到5g/L以上),对于Protein A层析介质的关注从上样的速度转到关注上样的载量(DBC)。事实上,现在普遍更关注的要点是DBC与上样的速度的平衡。
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